EDTA(二鈉,溶液配制,溶解度,作用)
Release Time:2022-10-06EDTA作用:
※ EDTA是一種化學螯合劑,可以螯合二價金屬離子,如Ca2+和Mg2+。
※ EDTA溶液也稱為Versene溶液。由于Ca2+和Mg2+是細胞膜的重要組成部分,具有凝集細胞的功能,EDTA可以破壞細胞之間的連接,促進細胞分裂為單個細胞。
※ EDTA毒性較小,價格低廉,使用方便,并且不會破壞細胞表面分子。
※ EDTA只與Ca2+和Mg2+結合,因此適用于需要檢測細胞表面分子的細胞消化。它還經常與胰蛋白酶溶液按一定比例混合。
※ EDTA產品:液體濃度:0.02%pH:7.2-7.4酚紅:陰性溶劑:10mM PBS EDTA:0.2g/L儲存:2-8°C裝運:RT有效期:18個月。

EDTA溶液配制步驟:
如果你想配制1L,0.2%EDTA溶液,取800ml。
1. 添加EDTA.2Na。2H2O(見表)。
2. 將燒杯放在帶有磁性顆粒的磁力攪拌器上。保持pH探針監測pH值。
3. 加入75%的NaOH顆粒(以20g/L為基礎計算粗制量,制成0.5M)。
4. 讓氫氧化鈉完全溶解。同時檢查二水EDTA二鈉的溶解情況。
5. 依次加入其余的氫氧化鈉顆粒。不要試圖一次添加大量內容。你可能會超過pH值。
6. EDTA完全溶解后,檢查pH值。必要時使用HCl。
7. 將溶液轉移到量筒中并調整體積。
8. 通過過濾器滅菌(0.22微米)或高壓滅菌進行滅菌。
摩爾濃度 | 100 ml | 250 ml | 500 ml | 1000 ml |
---|---|---|---|---|
100 mM | 3.72 g | 9.30 g | 18.61 g | 37.22 g |
0.25 M | 9.31 g | 23.26 g | 46.53 g | 93.06 g |
0.5 M | 18.61 g | 46.53 g | 93.06 g | 186.12 g |
EDTA用途:
1. 在化學水平上,EDTA 與金屬離子形成配位化合物,從而使它們失活。
2. 生物化學家使用EDTA用于提高或降低酶的活性。
3. 無機化學家使用它作為化學緩沖液。
4. EDTA(鈉鈣EDTA)的變體用于治療鉛(Pb)和汞(Hg)中毒。
5. EDTA還可用作加工食品和化妝品的防腐劑。
6. TAE、TBE、DNA負載染料、Tris-EDTA、胰蛋白酶EDTA的成分。
EDAT用途的案例:
1. 提高或降低酶的活性案例:
DNA聚合酶的活性需要Mg2+。溶液中存在EDTA會導致Mg2+的隔離。這最終使Mg2+無法用于DNA聚合酶,從而降低其活性。EDTA的螯合性能在DNA分離時是一個優勢(降低DNA酶活性以防止DNA降解),而在PCR中是一個劣勢(需要DNA聚合酶活性)。
2. 提高酶的活性案例:
胰蛋白酶EDTA用于通過破壞細胞間基質,從貼壁細胞培養物中制備單細胞懸浮液(去除電鍍細胞)。鈣和鎂離子可增強細胞間粘附。胰蛋白酶混合物中存在EDTA,可以隔離增強基質的離子。捕獲這些離子會削弱相互作用并促進胰蛋白酶消化。
3. EDTA溶解度.
對于大多數應用,EDTA.2Na。使用pH 8.0的2H2O溶液。EDTA在中性pH下的溶解度很低,因此必須將溶劑(H2O)的pH值提高到8才能增加溶解度。
用于制備0.5M EDTA.2Na。2H2O溶液,大約需要20g NaOH。您可以以顆粒形式添加NaOH或10N NaOH溶液。如果pH過高,則使用HCl。