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DAPI(介紹,染色步驟,染色,毒性)
Release Time：2022-06-07DAPI 介紹：
DAPI (DAPI化學名：4',6-diamidino-2-phenylindole) 是一種 DNA 特異性探針，DAPI 是一種熒光染料，通過附著在富含 A-T 的 DNA 序列的小樹林中形成熒光復合物。 DAPI 還可以穿透細胞膜與細胞核中的雙鏈DNA結合進而發揮出生物標記的作用，可以產生比 DAPI 本身 強約 20倍的熒光。 與EB（溴化乙啶）相比較，DAPI 對雙鏈DNA的染色靈敏度高很多倍。顯微鏡下可以看出顯藍色熒光的細胞。DAPI 可作為 DNA 特異性探針在組織化學和生物化學中用于流式細胞術、染色體染色、DNA 可視化和定量的應用。
DAPI染色原理：
DAPI 是一種可以與 DNA 進行強力結合的最常用的熒光染料。DAPI 結合至雙鏈 DNA小溝 的AT堿基對位置，一個 DAPI分子 可占據約三個堿基對位置。結合到 雙鏈DNA 上的 DAPI分子 后的熒光強度大約可提高20倍，一般采用熒光顯微鏡進行觀測即可，依據熒光強度可以確定出DNA的量。此外，因 DAPI 可透過完整的細胞膜，也可用于 活細胞 和固定細胞的染色。在熒光顯微鏡下進行觀察，DAPI染料 是利用紫外光波長的光線進行激發。單獨 DAPI 的最大吸收波長是340nm，DAPI的最大發射波長是488nm；當 DAPI 與 雙鏈DNA 進行結合，DAPI的最大吸收和發射波長分別為：364nm，454nm（10 mM Tris pH7.0，100 mM NaCl，10 mM EDTA），其發散光的波長范圍含蓋了藍色至青綠色。DAPI也可與RNA進行結合，但產生的熒光強度只有約為DNA結合的熒光強度的1/5，其發散光的波長范圍約在500nm左右。
DAPI染色步驟：
DAPI的染色步驟見鏈接：
《怎么使用DAPI進行染色》
http://www.usgrt.com/cn/content/427.html
